Diagnóstico de la Candidiasis y estudio en el laboratorio
Cuando existe lesión visible, el examen directo permite establecer un diagnóstico de la candidiasis presuntivo rápido, aunque no la especie infectante excepto en los casos de Cándida Glabrata, donde la ausencia de pseudo micelio y su pequeño tamaño nos permitiría sospecharla.
La visión directa puede realizarse en fresco con KOH al 40% en el caso de tratarse de muestras líquidas (preferiblemente tras concentración con centrifugación para aumentar la rentabilidad del examen directo) o podemos emplear tinciones (Gram, Giemsa, Wright, PAS, metenamina plata, o blanco de calcoflúor) para revelar la presencia fúngica.
Cuando se trata de tejidos es necesario realizar cortes histológicos y tinciones adecuadas. Si bien el examen directo es rápido, cuando existen pocos elementos fúngicos puede ser negativo siendo más sensible y específico el cultivo para poder establecer un diagnóstico de la candidiasis preciso.
Cultivo microbiológico
Las levaduras del género Candida son poco exigentes, crecen con facilidad en 24-48 h a 35-37 °C en medios habituales como el agar dextrosado de Sabouraud con/sin cloranfenicol (Figura 1), sin embargo, el empleo en la actualidad de medios cromógenos diferenciales (Figura 2) permite detectar la existencia de infecciones causadas por varias especies de Candidae incluso hacer una presunción de especie, útil a la hora de implantar la terapia antifúngica inicial.
Otra forma de probar que estamos ante una CI es el aislamiento de Cándida spp. en un hemocultivo coincidiendo con un cuadro clínico compatible. Sin embargo, aunque en los últimos años han mejorado las técnicas de hemocultivo para la detección de la candidemia, su sensibilidad se sitúa en torno al 40-60% para establecer el diagnóstico de candidiasis profunda.
Lo cierto es que existe una relación entre el número de tejidos profundos afectados por la infección y el nivel de fungemia, así por ejemplo en enfermos en los que solo hay afectación de un órgano la sensibilidad del hemocultivo es del 28% frente al 78% cuando existen más de tres sitios afectados (Diagnóstico tradicional de la candidiasis invasora en la UCI Cuétara MS, et al.).
El estudio microbiológico tiene por objeto analizar la presencia de levaduras (diferentes especies del Género Candida) así como de mohos filamentosos, hialinos o dimórficos (Aspergillus sp. Mucor sp. Geotrichum sp.).
Las especies de levaduras más frecuentemente recuperadas en análisis de Disbiosis son las siguientes: Cándida albicans, Cándida tropicalis, Cándida glabrata, Cándida parapsilosis, Cándida krusei. en proporción menor C. guillermondii, C. inconspicua, C. lambica, C. rugosa, C. stellatoidea (Mouton, 2003).
Figura 1. Cultivo mixto en agar de Sabouraud con dextrosa y cloranfenicol de Candida tropicalis y Candida parapsilosis
Figura 2. Cultivo de Candida tropicalis y Candida parapsilosis en CHROMagar Candida
Tipos de cultivo microbiológico
Según los síntomas manifestados por el paciente el laboratorio deberá obtener muestras de las distintas mucosas posiblemente afectadas, para evidenciar su presencia por cultivo e identificar de la/s especie/s causante/s. También se pueden realizar pruebas de resistencias a los distintos antifúngicos para el diagnóstico de la candidiasis.
Cultivo de exudado vaginal
Deberá estudiarse también la flora comensal y otras posibles alteraciones de la mucosa vaginal, o presencia de leucorrea, evidenciadas por análisis microscópico de la muestra.
Cultivo de frotis orofaringeo
Distintas localizaciones de la mucosa bucal: lengua, paladar, encías, faringe… pueden verse afectadas por la invasión por Cándidas, por lo que su investigación en estas puede revelar su presencia por recuperación en cultivo en medio específicos.
Cultivo de exudado conjuntival
El examen oftalmológico es una herramienta importante para monitorizar a la población en riesgo de CI, pudiendo establecer el diagnóstico de diseminación tanto en pacientes con hemo cultivos negativos como con candidemias detectadas.
Cultivo de exudado nasal
Si el paciente presenta secreción, o congestión nasal puede ser de interés el estudio microbiológico de este exudado.
Cultivo de heces
En este estudio se realiza El perfil analítico para la evaluación de la Disbiosis intestinal incluye la realización de cultivos microbiológicos específicos que permiten la determinación y sus proporciones de cada una de las especies que conforman la flora intestinal esto es, flora residente, flora pasajera y posible presencia de flora entero patógena. Asimismo, se realiza un estudio micológico al objeto de evaluar la presencia de levaduras y mohos.
Tipos de cultivo microbiológico
Cultivo de exudado vaginal
Deberá estudiarse también la flora comensal y otras posibles alteraciones de la mucosa vaginal, o presencia de leucorrea, evidenciadas por análisis microscópico de la muestra.
CUltivo de frotis orofaringeo
Cultivo de exudado conjuntival
Cultivo de exudado nasal
Si el paciente presenta secreción, o congestión nasal puede ser de interés el estudio microbiológico de este exudado.
Cultivo de heces
Cuantificación de Arabinosa en orina
La Arabinosa, azúcar de cinco carbonos con la función de aldehído llamada aldosa, suele encontrarse elevada en presencia de candidiasis intestinal. Se sospecha que el arabitol producido por las levaduras en el tracto gastrointestinal se absorbe en la circulación portal y luego se convierte en arabinosa por medio del hígado. Este azúcar, no se metaboliza endógenamente y se elimina por la orina, en consecuencia, niveles altos de arabinosa en orina, pueden ser un buen indicador de infecciones por cándidas. Siendo, así, un buen indicador para el diagnóstico de la candidiasis.
Asimismo, niveles altos de Arabinosa se ha visto asociado a autismo en niños. Se sospecha que estos pacientes pueden presentar deficiencias de una o más enzimas que participan en el metabolismo de las pentosas. Del mismo modo, niveles elevados de Arabinosa ligada a proteínas en glicoproteínas de suero, han sido referidos en pacientes esquizofrénicos y en niños con trastornos de la conducta. La alteración de la función de las proteínas es otro de los mecanismos por medio de los cuáles la arabinosa puede afectar a procesos bioquímicos. Se han encontrado también niveles elevados de Arabinosa en muestras urinarias de mujeres con vulvovaginitis debido a cándidas.
Cuantificación de ácido tartárico en orina
El ácido tartárico es un análogo (una sustancia química muy parecida) del ácido málico. El ácido málico es un compuesto intermedio del ciclo de Krebs, un proceso bioquímico por el cual obtenemos energía de los alimentos. El ácido tartárico es conocido como inhibidor de una enzima del ciclo de Krebs llamada fumarasa que produce ácido málico a partir del ácido fumárico, por lo que presumiblemente el ácido tartárico es tóxico pues inhibe la producción bioquímica de un compuesto llamado ácido málico.
La presencia de ácido tartárico en la orina ha sido relacionado con el autismo. La fuente de ácido tartárico es la levadura. Este compuesto forma una nata en el proceso de fermentación del vino y tiene que ser removida. El vino es agua azucarada fermentada en alcohol por levadura (Saccharomyces cerevisiae). El ser humano no produce esta sustancia.
Mejorías en niños con autismo comúnmente citadas por los padres después del tratamiento antimicótico incluyen: disminución de la hiperactividad, aumento de contacto visual, aumento en la vocalización (más palabras y más uso de lenguaje), mejor patrón de sueño, mejor concentración, aumento de juego imaginativo, reducción de conductas estereotípicas, y mejor desempeño escolar. Dos niños tratados con terapia antimicótica, de sensibilización a alergias alimenticias, dieta sin gluten y caseína, se han recuperado completamente del autismo.
Recomendaciones para la toma de muestras clínicas
Muestras para cultivo microbiológico
Toda muestra clínica para estudio microbiológico debe ser obtenía con la máxima asepsia y procesada lo antes posible por el laboratorio. Por ello, en los estudios extra hospitalarios, salvo en el caso de las muestras de orina que pueden ser obtenidas inmediatamente antes en el domicilio, el resto deberá ser obtenida en el laboratorio por el microbiólogo.
Muestras de suero para detección de anticuerpos
Toda muestra obtenida por extracción sanguínea deberá ser obtenida en un centro autorizado, provisto de centrífuga y realizada por el especialista en análisis clínicos o en su defecto, por personal sanitario cualificado.
Muestras de orina para estudio de metabolitos
Deberá obtenerse la primera orina de la mañana y ser entregada en el laboratorio a la mayor brevedad posible, protegida de la luz y del calor.
No es recomendable su envío por mensajería.
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